液相色譜儀 -發(fā)展歷史 1960年代，由于氣相色譜對高沸點(diǎn)有機物分析的局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開(kāi)發(fā)了世界上*臺液相色譜儀，開(kāi)啟了液相色譜的時(shí)代。液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數，以高壓驅動(dòng)流動(dòng)相，使得經(jīng)典液相色譜需要數日乃至數月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內完成。
 

　　1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現代實(shí)踐》一書(shū)，標志著(zhù)液相色譜法 (HPLC)正式建立。在此后的時(shí)間里，液相色譜成為zui為常用的分離和檢測手段，在有機化學(xué)、生物化學(xué)、醫學(xué)、藥物開(kāi)發(fā)與檢測、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應用。液相色譜同時(shí)還極大的刺激了固定相材料、檢測技術(shù)、數據處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。
 

　　1960年代前，使用的填充粒大于100μm，提高柱效面臨著(zhù)困境，后來(lái)的研究人員便采用微粒固定相來(lái)突破著(zhù)一瓶頸?？瓶颂m、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相，這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼，實(shí)現了高速傳質(zhì)，為液相色譜技術(shù)的發(fā)展奠定了穩固的基礎。隨著(zhù)填料粒徑的降低，更高的柱效也得以實(shí)現。1960年代研制出氣動(dòng)放大泵、注射泵及低流量往復式柱塞泵，但后者的脈沖信號很大，難以滿(mǎn)足液相色譜的要求。1970年代，往復式雙柱塞恒流泵，解決了這一問(wèn)題。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠，平均粒徑只有7μm，具有*的柱效，并逐漸取代了無(wú)定形微粒硅膠。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩定性大為提高，多次使用成為可能。1970年后，適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點(diǎn)。1980年后，改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問(wèn)題，人們越來(lái)越認識到改變流動(dòng)相的組成是提高選擇性的關(guān)鍵。