處于良好操縱狀態(tài)的泵,應該能使色譜圖上的基線(xiàn)平穩;保存時(shí)間的重復性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動(dòng)小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力變化應是緩慢平穩的。
1 在日常使用過(guò)程中出現壓力不穩的現象。主要原因有幾點(diǎn):
1.1 管路里有氣泡。
1.2 輸進(jìn)單向閥失效所致,這也是經(jīng)常遇見(jiàn)的。
1.3 密封圈磨損導致泄漏所造成。
2 壓力不穩的排除方法如下:
2.1 排除管路里氣泡的方法是:
打開(kāi)排空閥,用針筒多抽幾下,排出氣泡。再用活動(dòng)相沖洗一段時(shí)間。為了加快排出氣泡,還可以關(guān)緊排空閥,堵住檢測器上的背壓管,使流通池的壓力增加,趕出氣泡(但需留意不能壓力太高,以免損壞流通池)。
2.2 排除單向閥失效的方法為:
2.2.1 造成單向閥失效原因:
2.2.1.1 泵內殘留活動(dòng)相與寶石球粘連。如長(cháng)期不使用輕易造成類(lèi)似情況,所以在長(cháng)期不使用的情況下,應每二周用甲醇作為活動(dòng)相,開(kāi)機沖洗1小時(shí),使管路布滿(mǎn)。
2.2.1.2 活動(dòng)相內雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。固然活動(dòng)相是HPLC級的,又經(jīng)過(guò)過(guò)濾,但長(cháng)期使用后仍難免會(huì )產(chǎn)生污染。
2.2.2 判定單向閥失效的方法:
2.2.2.1 將泵接上蒸餾水作為活動(dòng)相。(請勿打開(kāi)UV檢測器與工作站)。
2.2.2.2 打開(kāi)排空閥,用30 ml的針筒抽出些活動(dòng)相,確認泵中已有該活動(dòng)相,然后將針筒內的液體排出,并重新接在排空閥上。
2.2.2.3 將泵設置流量為5ml/min,沖洗5min(留意:此時(shí)排空閥仍要打開(kāi),否則將沖壞色譜柱)。
2.2.2.4 沖洗完畢后,查看針筒內活動(dòng)相體積是否為25ml(5×5=25),若正確,則說(shuō)明該泵在低壓情況下*;若不正確,則說(shuō)明該泵中某一單向閥失效(一般多為輸進(jìn)單向閥)。
2.2.2.5 如是雙泵梯度分析系統,泵壓力不穩一般是其中一臺壓力不穩所致,可逐個(gè)分析。
2.2.3 單向閥失效處理方法:
2.2.3.1 擰下輸進(jìn)單向閥(一共兩個(gè))。
2.2.3.2 將2個(gè)單向閥放進(jìn)有蒸餾水的超聲波清洗器,清洗10分鐘。
2.2.3.3 用沖洗工具沖洗二、三次。沖的時(shí)候留意要用手按住單向閥前頭,防止把閥內零件沖失。
2.2.3.4 完畢后,將輸進(jìn)單向閥裝回原位即可(單向閥是高壓部件,須擰緊,防止泄漏)。
若梯度系統兩個(gè)泵在低壓狀態(tài)下流量都正確,則建議分別將兩泵連接上色譜柱進(jìn)行高壓測試。