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制備液相色譜儀注意事項

更新時(shí)間:2022-09-15      點(diǎn)擊次數:1312
制備液相色譜儀廣泛應用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著(zhù)合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域對高純度組份的需求不斷增加,制備型液相色譜儀應用的領(lǐng)域也在迅速的擴大發(fā)展。
制備液相色譜儀注意事項:
一、加裝保護柱
保護柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污然,因此,加裝保護柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護分析柱不可少的措施。
二、過(guò)濾流動(dòng)相和樣品
流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過(guò)色譜柱的流動(dòng)相均應過(guò)濾,但在實(shí)際操作上應視具體情況而有所區別:當有機溶劑用色譜純級,水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有機溶劑的質(zhì)量且沒(méi)有受到污染時(shí),過(guò)濾并無(wú)更多實(shí)際意義。
三、凈化樣品
當樣品中含有對色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生*性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機分子和強吸附性物質(zhì),以及可能對柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團離子。在進(jìn)樣前應盡可能對樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。
四、正確及時(shí)的沖洗
開(kāi)始試驗前,應了解柱中當前是何種溶劑。對于新色譜柱,如無(wú)特殊說(shuō)明均為評價(jià)報告中所用流動(dòng)相。柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動(dòng)相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過(guò)渡。

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