本儀個(gè)圓今天掐指一算，好像有段日子沒(méi)有給大家發(fā)福利了，就想著(zhù)什么樣的福利才是大多數人都需要的呢？
 

　　最后小編把主意放到了我們行業(yè)內的“四大名譜”上，然后又在四大譜里pick了我們的液相色譜！畢竟其他三譜前一陣子都開(kāi)設了訓練營(yíng)，相信小伙伴們都不會(huì )care我的小知識了！
 

　　而液相色譜柱的使用應該是液相的新人同學(xué)都比較頭疼的事，為什么...新買(mǎi)不久的柱子，這么快就要“退休”呢？！其實(shí)也不怪你...是他太脆弱！當然你照顧好他也還是會(huì )堅守崗位的！而延長(cháng)液相色譜柱壽命的問(wèn)題上網(wǎng)一搜也是層出不窮，看來(lái)大家都比較在意這嬌弱的柱子呀！
 

　　然后奉上今天的3個(gè)小知識，進(jìn)一步的了解色譜柱，說(shuō)不定就能讓他多堅持一會(huì )兒哦！(福利在文章底部【小知識后面】！不要傻傻的直接劃走！)
 

　　01.怎樣提高液相色譜柱的柱效？
 

　　解答：(1)要想提高液相色譜法的柱效，應當用小而均勻的固定相顆粒填充均勻，以減小渦流擴散和流動(dòng)相傳質(zhì)阻力，這是最佳的提升柱效的方法。
 

　　(2)選用低黏度的流動(dòng)相(如甲醇、乙腈等)，也有利于減小傳質(zhì)阻力，提高柱效。
 

　　(3)合適的柱溫也會(huì )影響到柱效。
 

　　(4)降低流速、增加柱長(cháng)也可以提高柱效。
 

　　02.液相色譜柱保護柱有何作用？
 

　　解答：(1)在使用高效液相色譜儀分析檢測樣品的過(guò)程中，液相色譜柱會(huì )受到來(lái)自于樣品及色譜系統的污染，從而導致液相色譜柱耐用性差、壽命縮短。來(lái)自于色譜系統的污染主要指：
 

　　a.液相色譜儀器系統中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒；
 

　　b.流動(dòng)相系統過(guò)濾不*殘留的固體顆粒；
 

　　來(lái)自于樣品的污染主要指：
 

　　a.未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統中；
 

　　b.由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異，導致沉淀析出污染系統。
 

　　特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測，因基質(zhì)的復雜性，色譜柱受污染的情況會(huì )更加嚴重。
 

　　(2)污染會(huì )導致色譜系統壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等，從而帶來(lái)檢測成本高，測試結果不準確等各種影響。
 

　　(3)保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材，使用保護柱可大大降低分析柱受污染的程度，延長(cháng)分析柱使用壽命。
 

　　(4)保護柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間，作用主要兩方面：
 

　　a.截留不溶性顆粒；
 

　　b.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)。
 

　　03.如何測試液相色譜柱的柱效？
 

　　解答：JJG705-2014《液相色譜儀檢定規程》中規定了液相色譜柱柱效的測試方法，具體測試方法如下：
 

　　(1)測試用標準溶液：反相色譜柱測試用的標準溶液為1×10-4g/mL尿嘧啶、1×10-5g/mL聯(lián)苯和蒽(荼)的甲醇溶液；正相色譜柱測試用的標準溶液為1×10-2mL/mL甲苯和1×10-4mL/mL硝基苯的正己烷溶液。
 

　　(2)將被測試的色譜柱接到檢定合格的液相色譜儀器上，反相柱用甲醇+水(85%+15%)為流動(dòng)相，正相柱用正己烷+異丙醇(99.5%+0.5%)為流動(dòng)相，流速為1mm/s(內徑為4.6mm色譜柱，流量為1.0mL/min)，紫外檢測器波長(cháng)為254nm，靈敏度選擇適中。儀器穩定后，從進(jìn)樣口注入10μL對應的色譜柱測試標準溶液，記錄色譜圖。
 

　　(3)柱效(理論塔板數)和色譜峰對稱(chēng)性的計算
 

　　由式(2-1)計算液相色譜柱柱效理論塔板數，重復測量3次，取平均值。
 

　　(2-1)中，n為理論塔板數；tR為色譜峰的保留時(shí)間，時(shí)間測量需精確到0.02min；為色譜峰半高峰寬；L為色譜柱長(cháng)。按照上述條件測得的色譜圖中，按式2-2計算色譜峰的不對稱(chēng)因子As。
 

　　As=b/α
 

　　(2-2)式中，a，b分別為通過(guò)圖片峰高處、平行于峰底的直線(xiàn)被峰兩側及峰高截取的兩線(xiàn)段的長(cháng)度。
 

　　(4)液相色譜柱性能要求
 

　　柱效：反相色譜柱的理論塔板數一般在3~4×104m-1范圍內，正相色譜柱的理論塔板數在4~5×104m-1范圍內。
 

　　色譜峰對稱(chēng)性：被測峰(蒽)的不對稱(chēng)因子As一般在0.8~1.6范圍內。