氣相色譜法是一種以氣相為流動(dòng)相的色譜方法。樣品流經(jīng)氣體系統并被氣化,最后進(jìn)入充滿(mǎn)填充物的色譜柱以實(shí)現有效分離。氣相色譜法具有高靈敏度、樣品用量少、分離能力強、選擇性好、應用范圍廣、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。
液相色譜法使用填充層、紙和薄板作為固定相。液相色譜在室溫下操作,不需要考慮在物質(zhì)分離過(guò)程中樣品揮發(fā)性和熱穩定性的影響。因此,液相色譜可用于分離和分析高熱敏性、難汽化和非揮發(fā)性物質(zhì)。根據其分離原理,液相色譜可分為四種類(lèi)型:吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠色譜。液相色譜法的工作原理與經(jīng)典液相色譜法類(lèi)似,主要區別在于填充顆粒的大小。液相色譜法主要用于分離分子量大、沸點(diǎn)高和不同極性的有機化合物。由于運輸流動(dòng)相需要高壓,因此液相色譜也被稱(chēng)為高壓液相色譜。
氣相色譜譜圖和液相色譜譜圖可以用相同的方法解析。檢測器輸出的數據為線(xiàn)形圖,檢測到的化合物數隨時(shí)間不同而變化。揮發(fā)性的化合物的峰首先出現在圖表上。圖中隨后出現的峰表示混合物的揮發(fā)性逐漸降低。研究人員可以使用這些色譜圖進(jìn)一步分解樣品中混合物的化學(xué)性質(zhì)。峰尺寸的比例與樣品中物質(zhì)的含量有關(guān)。峰下的面積用于確定樣本大小。例如,要確定樣品中的成分,首先需要分析已知濃度的標準樣品,將標準品色譜圖上的保留時(shí)間和峰面積與測試樣品進(jìn)行比較,獲得樣品中的目標化合物濃度。
在氣相色譜中,樣品溶液進(jìn)入蒸發(fā)室后,由載氣(載氣通常為氮氣或氦氣)輸送進(jìn)入色譜柱。在色譜柱中分離出不同的成分,最后流出色譜柱。柱中的活動(dòng)由檢測器進(jìn)行檢測。每個(gè)成分逐一檢測之后,記錄器、積分器或數據處理系統會(huì )記錄下這些色譜信號。
在液相色譜中,液相流動(dòng)相流經(jīng)輸液泵,與樣品溶液混合,最后流出色譜柱。吸附分離在柱中進(jìn)行。在色譜檢測站,檢測器最終將所有成分轉換成電信號,或相應的樣品峰。
氣相色譜可用于手性化合物的化學(xué)分離實(shí)驗、對羥基苯甲酸酯食品防腐劑中對羥基苯甲酸酯的分離與測定、各種農藥的分離、血漿中摻雜的檢測以及環(huán)境污染物化學(xué)成分的檢測等多方面研究。液相色譜法在食品檢測,例如食品中有毒有害物質(zhì)、微生物產(chǎn)品、營(yíng)養物和添加劑的檢測、環(huán)境中農藥污染的潛在生物標志物的研究以及血漿和尿液中毒素的測定等。
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