紫外可見(jiàn)吸收檢測器是液相色譜儀HPLC中應用廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點(diǎn)是靈敏度較高,線(xiàn)性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對強吸收物質(zhì)檢測限可達1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見(jiàn)檢測器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實(shí)際上就是裝有流動(dòng)地的紫外可見(jiàn)光度計。
紫外吸收檢測器UV檢測器是液相色譜儀HPLC中常用的檢測器,它占液相色譜儀HPLC檢測器使用率的75%,生產(chǎn)液相色譜的廠(chǎng)家基本都會(huì )配帶這種檢測器。
紫外吸收檢測器UV檢測器特點(diǎn)
● 靈敏度高,小檢測量可達10-9g/mL,也可以檢測對于紫外吸收弱的組分;
● 線(xiàn)性范圍寬,大多數UV檢測器可以在1.5-2.0AU下保持良好的線(xiàn)性;
● 不易受溫度、流速等因素的影響
● 可用于梯度洗脫
● 可與不同檢測器串聯(lián)使用,如雙光路雙流路紫外/熒光檢測器(UV/FLD-1)
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)射出紫外-可見(jiàn)區范圍的連續波長(cháng),并安裝一個(gè)光柵型單色器,其波長(cháng)選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個(gè)流通池,一個(gè)作參比,一個(gè)作測量用,光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過(guò)純的均勻溶劑,則它們在紫外波長(cháng)下幾乎無(wú)吸收,光電管上接受到的輻射強度相等,無(wú)信號輸出。當組分進(jìn)入測量池時(shí),吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強度不等,這時(shí)有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
局限:流動(dòng)相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動(dòng)相,每種溶劑都有截止波長(cháng),當小于該截止波長(cháng)的紫外光通過(guò)溶劑時(shí),溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長(cháng)不能小于溶劑的截止波長(cháng)。
總結紫外吸收檢測器的優(yōu)點(diǎn)、缺點(diǎn)
基于試樣組分對特定波長(cháng)紫外可見(jiàn)光的選擇性吸收,組分濃度與吸光度成正比
1. 優(yōu)點(diǎn)
① 靈敏度高,其最小檢測量10-9g/mL;
② 線(xiàn)性范圍寬;
③ 可用于梯度洗脫;
④ 波長(cháng)可選,易于操作;
⑤ 可與任何檢測器串聯(lián)使用
2. 缺點(diǎn)
① 對紫外光不吸收的試樣不能檢測;
② 溶劑的選擇受限制
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