*,制藥領(lǐng)域中許多生物分析化合物都是堿性的,可以通過(guò)疏水性或陽(yáng)離子交換吸附劑輕易地提取。不過(guò),降脂他汀類(lèi)和抗炎藥卻大多是酸性的。使用傳統的疏水性方法無(wú)法提取這些酸性化學(xué)物。因此,安捷倫開(kāi)發(fā)出一種命名為Bond Elut Plexa PAX的新型聚合物強陰離子交換填料,專(zhuān)門(mén)用于簡(jiǎn)化該提取過(guò)程。
我們開(kāi)發(fā)了一種簡(jiǎn)單通用的方法,使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性化合物。為了評估該方法的性能,我們測定了吸附劑床的分析物回收率、提取樣品響應的線(xiàn)性以及加標血漿樣品分析的準確性和度。
由于方法的驗證過(guò)程非常耗時(shí)并且需要準確度*的數據,因此只有速度快、回收率好、重現性高的固相萃?。⊿PE)方法才能令人滿(mǎn)意。如果能對 SPE 過(guò)程進(jìn)行優(yōu)化且不損害數據完整性,便能夠簡(jiǎn)化和縮短方法的驗證過(guò)程。Bond Elut Plexa 系列采用通用的方法,zui大程度縮減方法開(kāi)發(fā)過(guò)程,同時(shí)還提高了分析靈敏度和重現性。
我們使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 96 孔板和2% NH4OH 、5% 甲酸進(jìn)行提取。圖 1 顯示了提取流程。將所有樣品蒸干,接著(zhù)使用5 mM 80:20 的甲酸銨: CH3OH 水溶液定容至 100 µL。然后在安捷倫 325-MS LC/MS(采用 vESI 離子源)儀器上進(jìn)行液相色譜/質(zhì)譜分析。
我們通過(guò)測定分析物響應并將其與加標流動(dòng)相標準品進(jìn)行比較來(lái)計算回收率。由于提取效率低、離子抑制效應或未洗脫導致的分析物損耗均會(huì )體現在回收率上。盡管一些回收率在 50% 至 60% 的范圍內,但響應是線(xiàn)性的,因為方法的曲線(xiàn)線(xiàn)性良好,準確性高。所有藥物的回收率均高于 50%,且重現性良好,相對標準偏差(RSD)低于 7%(表 1)。
| ||||||||||||||||||||||
從 0.5 到 200 ng/mL 的線(xiàn)性良好(圖 2).選擇 50 ng/mL 的中點(diǎn)濃度測定校正曲線(xiàn)的準確度 (表 2). zui后, 圖 3 顯示的樣品色譜結果展示了該方法有效性。
藥物 | 0.5 ng/mL | 50 ng/mL | ||
---|---|---|---|---|
準確度 (%) | % RSD (n=8) | 準確度 (%) | % RSD (n=8) | |
阿托伐他汀 | 90 | 11 | 106 | 11 |
雙氯芬酸 | 116 | 14 | 109 | 6 |
速尿 | 99 | 14 | 95 | 9 |
酮基布洛芬 | 104 | 13 | 108 | 4 |
普伐他汀 | 108 | 9 | 96 | 8 |
上述結果表明,安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 使用此簡(jiǎn)便方法提取酸性化合物異常簡(jiǎn)單。更好的是,該吸附劑對所有化合物都能提供較高的回收率,人體血漿中 0.5 至 200 ng/mL 的藥物樣品能夠獲得良好的線(xiàn)性。此外,校正曲線(xiàn)也呈線(xiàn)性,一階線(xiàn)性回歸的相關(guān)系數均大于 0.995。對于所有化合物而言,該方法準確性高,重現性好,大多數結果都在實(shí)際值的 ±10% 以?xún)?,RSD 低于 15%。
全面了解安捷倫 Bond Elut解決方案。然后將安捷倫 Bond Elut Plexa PAX和固相萃取產(chǎn)品組合引入您的實(shí)驗室。
聯(lián)系我們
杭州天釗科技有限公司 公司地址:杭州市西湖區金蓬街321號2幢C座511室 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)掃一掃 更多精彩
網(wǎng)站二維碼
微信二維碼
微信掃一掃