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8-29
氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,但也有例外,像安捷倫的氨基柱保長(cháng)期保存要保存在純乙腈中,具體哪個(gè)廠(chǎng)家的柱子的保存方法要看柱子的說(shuō)明書(shū),根據要求來(lái)保存。說(shuō)一下氨基柱的使用注意事項。1.正相使用1.1新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再根據流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相...
8-24
1.流動(dòng)相溶劑應選擇HPLC的溶劑或依此為標準的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過(guò)濾、脫氣,清除微粒和灰塵。在送液泵內,為了防止雜物(固體)進(jìn)入流路,裝有吸濾器,但網(wǎng)孔徑為10μm,比此更小的顆粒仍然可通過(guò),這會(huì )導致流路和柱子堵塞和污染。為此,建議常用0.45μm濾膜過(guò)濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣,如不脫氣,在溶劑混合時(shí),或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡,會(huì )導致泵誤動(dòng)作和輸液不暢,檢測器產(chǎn)生噪聲信號等。2.流動(dòng)相恢復到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí),流動(dòng)相在恢復到室溫前,基...
8-22
1.如何進(jìn)行色譜柱的維護?①建議檢測前樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾。②建議每天做完樣品后及時(shí)進(jìn)行清洗。③常規檢測:測試完后直接把色譜柱反向連接采用90%有機相沖洗45min,最后保存在純甲醇或純乙腈中。④使用緩沖鹽條件:a等度條件:使用緩沖鹽之前和之后都用過(guò)渡流動(dòng)相以1ml/min流速沖洗45min。b梯度條件:使用緩沖鹽之前與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1ml/min流速沖洗45min。注意:過(guò)渡流動(dòng)相是指有機相和水相比例與分析流動(dòng)相相同比例,只是不含有緩沖鹽。緩沖鹽沖洗干凈后...
8-19
分析型等度系統由高壓輸液泵、檢測器、進(jìn)樣閥、溶劑托盤(pán)(瓶)、色譜柱、工作站軟件等組成;安裝、調校及使用都非常簡(jiǎn)單。本套系統運行可靠,操作方便,能夠勝任常規實(shí)驗室的使用要求。分析型等度系統的特點(diǎn):優(yōu)化的輸液泵雙柱塞桿串聯(lián)設計,采用凸輪驅動(dòng),懸浮式柱塞導向的安裝方式,數字脈動(dòng)阻尼器,使得輸液脈動(dòng)更底;步進(jìn)電機細分控制使泵運行平穩;進(jìn)口高質(zhì)量柱塞桿和密封圈,大大提高了儀器穩定性和耐用性。保證系統低故障率,安全可靠性。穩定可靠的溶液輸送系統,色譜泵持續運轉,滿(mǎn)足實(shí)驗室任何苛刻需求。優(yōu)...
8-18
核心提示:HPLC系統內部可能的污染物來(lái)自人的觸摸,暴露在實(shí)驗室化學(xué)環(huán)境,與零部件制造相關(guān)的殘留物,或來(lái)自先前的流動(dòng)相和樣品的殘余物。HPLC系統內部可能的污染物來(lái)自人的觸摸,暴露在實(shí)驗室化學(xué)環(huán)境,與零部件制造相關(guān)的殘留物,或來(lái)自先前的流動(dòng)相和樣品的殘余物。雖然HPLC系統自身也會(huì )逐步地被流動(dòng)相清洗,但某些釋放出的雜質(zhì)會(huì )吸附在色譜柱上以及檢測器潤濕的表面上,因而會(huì )降低總的性能。?磷酸清洗:通常用于從系統中除去有機雜質(zhì)??赡苁怯捎谙礈熳饔?,它似乎比強有機溶劑更好也更快。這一步清...
8-17
研究?jì)热莶僮鬟^(guò)程一般技術(shù)要點(diǎn)說(shuō)明方法摸索優(yōu)化目標優(yōu)化梯度條件,確定分析波長(cháng)。1、樣品溶劑選擇;2、濾膜吸附試驗;3、DAD檢測器下,波長(cháng)選擇主成分最大吸收或平臺處。4、分離條件選擇;5、色譜柱對比;(根據情況酌定)6、DAD檢測器下,水、1mol/l酸、堿、氧(10%雙氧水)、光照、高溫破壞,各起始物料,中間體,輔料(制劑研究時(shí)需同時(shí)進(jìn)行空白輔料破壞)等成分分離。1、一般在無(wú)參考標準或標準的方法無(wú)法直接套用時(shí),需進(jìn)行此項研究?jì)热?,?類(lèi)藥。2、樣品溶劑:對樣品有很好的溶解能力...
8-15
液相色譜檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。1、紫外吸收檢測器紫外吸收(UV)檢測器是目前HPLC應用廣泛的檢測器。其工作原理是朗伯-比爾定律。這種檢測器靈敏度高,線(xiàn)性范Χ寬,對流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫分離。紫外吸收檢測要求被檢測樣品組分有紫外-可見(jiàn)光吸收,而使用的流動(dòng)相無(wú)吸收,或在被測組分吸收波長(cháng)處無(wú)吸收。一般選擇在欲分析物有最大吸收的波長(cháng)處進(jìn)行檢測,以獲得最大靈敏度和抗干擾能力。...
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